アラビノースオペロンの発現
BioRAD社の遺伝子組換えキットは、ＧＦＰ遺伝子はアラビノースオペロンとして組み込まれています。
キットで作成する4枚は次の通り。
１ −ＤＮＡ ＬＢ培地 プラスミドを取り込ませておらず、培地はＬＢ培地 → まいた全ての大腸菌が繁殖
２ −ＤＮＡ ＬＢ／ａｍｐ培地 １の培地に抗生物質のアンピシリンを添加したもの → アンピシリンによって全滅
３ ＋ＤＮＡ ＬＢ／ａｍｐ培地 → プラスミドにはアンピシリン抵抗性の遺伝子が組み込まれているので、プラスミドを取り込んだものだけがコロニーを作る。
しかし、アラビノースがないので、発現しない。
４ ＋ＤＮＡ ＬＢ／ａｍｐ培地 → アラビノースが入っているので、アラビノースオペロンにスイッチが入り、発現して光る。
肝心のＧＦＰ遺伝子はアラビノースオペロンとして組み込まれているので、アラビノースがなければ、発現しません。上の３と４はその違いを観察させるためのものです。
アラビノースがスイッチになっていることをより実感させるには、３のプレートにアラビノースを添加してスイッチが入って光っていくようすを見せるのが良いのですが、生徒にやらせるほどではないので、添加後をインターバル撮影しました。
朝の9時に添加し、12時間後までです。