第３６回（平成14年11月23日　於：川越女子高校）

テーマ：ＤＮＡの抽出

参加者：小林（熊谷高）、平岩（越谷南高）、森田（川越女子高）　敬称略

＜準備＞

材料　芽の部分だけを切りとって凍らせたブロッコリー、凍らせたニワトリのレバー

道具　ミキサー、フードプロセッサー、ガーゼ（あるいはさらし）、ビーカー、ろ紙、漏斗、薬さじ、ミニ薬さじ、ガスバーナー、三脚、石綿金網、試験管ばさみ、　２mol/l食塩水、エタノール（９５％以上）、氷

＜方法＞
−ブロッコリー−
１．予め芽の部分だけを切りとって冷凍しておく（写真は１個分）


２．台所用中性洗剤を一押し加えて、フードプロセッサーで５分間粉砕する。
このとき、温度が上がらないよう注意する（氷温が望ましい）
うまく粉砕できない時は、少量の水を加える（写真の物は５０ｍｌぐらい）。


３．粉砕した物６０ｍｌに対して食塩を５ｇ程度（終濃度が１〜２ｍｏｌ／ｌの間に入るように）加えて、よくかき混ぜる。


４．湯煎（５分程度）


５．さらしでろ過する。写真のように薬さじなどで押さえながらねじるようにするとうまく絞れる。
３０ｍｌ程度を絞る。


６．ろ液を氷水でよく冷やす

７．冷エタノール（氷に付けておくか、あるいは冷凍庫に入れておいても良い）を静かに加える。
ろ液の３倍程度加える。加えすぎても問題はない（もったいないだけ）


８．ミニ薬さじを逆さにして、三角の部分で巻き取る。
ガラス棒だと、滑ってしまってうまくとれない。家庭で行う時は割り箸でも良いかもしれない。


９．巻き取ったＤＮＡを他のビーカーに移し、ついてきてしまったエタノールをよく切る。
受けるビーカーはあたらしい方が良い（失敗してＤＮＡを落としても戻せるから）。


１０．少量（２０ｍｌ程度、とれたＤＮＡによっても変わる）の１０％食塩水を加えて、突っつきながらよく溶かす。


１１．再び湯煎（３分）

１２．熱いうちにろ紙で濾過する。
写真のようなろ紙の使い方でなく、ひだ折りにした方が良い。


１３．方法７と同様にろ液をよく冷やしてから、冷エタノールを静かに入れる。


１４．ミニ薬さじで巻き取る。


−トリのレバー−
１．予め、１匹分ずつ分けて冷凍しておく（「レバー」として売っているものには心臓がついてくることが多いので、取り除いておく）


２．粉砕しやすいように、ある程度小さく切る。


３．台所用中性洗剤を一押しした水道水１００ｍｌとともに、切ったレバーをミキサーに入れ、連続で２分間粉砕する。
このとき、温度が上昇しないように注意する（氷温が望ましい）。


４．レバー粉砕物４０ｍｌに、２ｍｏｌ／ｌの食塩水を４０ｍｌ強入れて（終濃度が１〜２ｍｏｌ／ｌの間に入るように）、よくかき混ぜる。


５．湯煎……以下、ブロッコリーの場合と同じ

６．ＤＮＡを巻き取る。


＜感想＞
１．やはり、ニワトリのレバーの方が、たくさんとれるし、失敗も少ない。
２．しかし、植物と動物の両方で、同じようなＤＮＡがとれることを示した方がおもしろそうだ。

＜参考＞
　このＨＰの
１．生徒実験・演示実験
−オリジナル編−
(1)ＤＮＡ抽出実験