テーマ：だ液アミラーゼの最適温度

阿部氏作

［目的］
　酵素の最適温度を確かめる実験は基本的な物であり、まあたらしい物ではない。
　また、だ液アミラーゼは酵素の中でも最も身近なものである。
　しかし、実際にきちんと最適温度を調べたことはないし、データも見かけない。
　さらに、市販の細菌由来のアミラーゼでは７０℃前後の高温が最適温度のものもあり、ヒトのだ液アミラーゼの最適温度には興味があった。


実験−その１−
［方法］
１．温度を一定に保った水の中に0.2％可溶性デンプン１０ｍｌを入れ、温度をなじませる。　


２．だ液(そのまま)を.02mlを入れ、反応を行わせる。

３．小型試験管にヨウ素液を一滴ずつ入れておく　(ヨウ素液を入れると分解は止まる)。


４．２分おきに反応液を１ｍｌずつ取り出し、ヨウ素液に入れ、発色させると共に反応を止める。


［結果］

１０℃でもまずまず反応しています。
この写真から見ると４０℃当たりが最適です。
６０℃までは反応が見られますが、７０℃では反応していないようです。


４分後のものを温度別に並べた物です。
この写真を見ると、３０℃が最も反応が進んでいるようにも見えます。　

photoshopでグレースケールにして、明るさを数値化したものをグラフにしてみました。３０℃と４０℃はほぼ同じでした。

実験−その２−
　どうやら３０〜４０℃の当たりが最適なのようなのでその当たりを５度刻みで調べてみると共に、
　１回目の実験の２分までの間の変化をもう少し詳しく調べた。
（１）酵素濃度を半減した。加えるだ液を0.1mlにした。
（２）１分おきに反応液を取り出して結果を見た。

［結果］
　実際の試験管を下から撮影したものです。これを見るとどうやら３０〜３５℃あたりが最もいいようです。



これは５分後のものを並べたものです。


photoshopでグレースケールにして、明るさを数値化したものをグラフにしてみました。３０℃あたりが最適なようです。
（ちょっとデータが格好悪いですが…）


［考察のような感想のような］
　正直に言って、この実験をするまでは最適な温度が高めに出るのではないかと思っていました。
市販されている細菌や植物由来のアミラーゼは高めでしたので。
　しかし、実際には３０〜３５℃あたりに最適温度があり、低めでした。
　また、１０℃や６０℃でもわずかながら活性があり、思ったよりも幅広い物でした。

　今回の実験は、定量実験としてはかなりラフな物ですので、データの信憑性は大まかな物でしかありません。
　反応には、バッファも使用しませんでした（反応液のｐＨは７．２でした）。


担当　森田保久

トップページに戻る