第57回(平成17年10月1日 於川口市立県陽高校)
1.はじめに
タンパク質の立体構造に関する知識は近年急増し、その情報はインターネット上で無償で公開されている。今回は、インスリンの分子情報(PDBファイル)と分子モデリングソフト(RasMol)から得られた情報をもとに、インスリンのリボンモデルを作成した。
下図は、これらを用いて表示したインスリンのリボンモデルである。
2.準備
インスリンのアミノ酸配列シール(PDBファイルに示されているアミノ酸配列からエクセルで作成し、ノーカットのA4ラベル用紙に印刷した)
インスリンの投影図(RasMolで作成)と透明塩化ビニール板
分子の物差し
園芸用針金
その他 α結合作成用の棒、0.28mm針金、ストロー、ビニールテープ、両面テープ、カッター、はさみ、画鋲、クリップなど
2.方法
(1)アミノ酸配列シールをカッターで切断する。
(2)シールは両面に貼るようになっているので、縦に半分に折る。
(3)園芸用針金をよく伸ばしてから、シールの裏面の紙をはがし、園芸用針金に貼り付ける。
(4)耐久性を高めるためにビニールテープを貼る。
(5)SS結合を作るところに、針金をまたぐように画鋲で2ヶ所穴を開け、あらかじめ針金を通しておく。
(6)赤で印刷してあるアミノ酸の部分を、αらせん作成用の棒でらせん状に巻く。
(7)インスリンの投影図の上に塩化ビニール板を載せてクリップで固定し、投影図とRasMolの画像を参考にしながら、β鎖から立体構造を作る。
必要に応じて、両面テープで塩化ビニール板の上にβ鎖を固定する。
続いて、α鎖の立体構造も作成する。
(8)分子の物差しで約4.5オングストロームの長さに相当する長さにストローを切り、SS結合用の針金に通して、該当するアミノ酸を結合する。
同様にα鎖とβ鎖を結びつけて、4次構造を作る。
(9)RasMolを使うと、特定の2つのアミノ酸間の長さや、3つのアミノ酸が作る角度を調べられる。
これらの情報をもとに、立体構造の細部を修正する。
投影図をはずして完成。
作成過程で、一次から4次構造へのイメージを実感できる。
1次構造と2次構造へ
3次構造と4次構造
3.参考文献
1)平岩真一:タンパク質のリボンモデルの作成と活用,遺伝,58,94ー96 (2004).
2)平岩真一:インターネット情報を使った生体分子教材の作成−PDBファイルとRasMolによる3D−,埼玉生物,39,10−13 (1999)
3)平岩真一:インターネット情報を使ったタンパク質の学習.授業実践CD−ROM高等学校編,日本教育工学振興会 (2002)
次のリボンモデルも作ることができます。
リゾチーム
ミオグロビン
tRNA
PDBファイルの入手先 http://www.genome.ad.jp/
RasMolの入手先 http://www.umass.edu/microbio/rasmol/index.html
RasMolの日本語マニュアル http://www.scl.kyoto-u.ac.jp/scl/appli/appli_manual/rasmol_manual/rasmol/rasmol.html
文責:平岩真一(川口市立県陽高等学校定時制)
E-MAIL hiraiwa@sam.hi-ho.ne.jp
Omnisサークル次回活動の予定
11月19日 於:埼玉県立熊谷高等学校
「テーマ:ピロニン・メチルグリーン染色」
参加自由。希望者は連絡下さい。 ymorita@mb.infoweb.ne.jp