材料:シソ(できれば青ジソと赤シソ)……他の材料に比べて色が濃くでるので、お薦めの材料です。
また、赤シソも展開させると青シソと同じになり、赤くても緑色植物だと言うことが実感できます。
薬品:抽出液…メタノール:アセトン=3:1(体積比)
展開液…トルエン(トルエンはいろいろな意味で扱いに注意が必要なので、場合によってはキシレンなど)
シリカゲル
熱湯
器具:(大型試験管+切れ目を入れたゴム栓)3セット、
試験管立て
乳鉢・乳棒2セット
ろ紙2枚
ビーカー(50ml)2個
ペークロ用ろ紙3枚
キャピラリー2本
はさみ
薬さじ
潰したアルミ缶ボトル
軍手
方法
1.シソの葉を2枚をはさみで細かく切り、シリカゲル(薬さじ一杯)と一緒に乳鉢・乳棒ですり潰す。
シリカゲルによって脱水されて、パウダー状になる。
2.抽出液を8ml入れて、もう一度すり潰す。
3.ビーカーに4つに折ったろ紙を入れて濾過する(漏斗を使った方が丁寧だと思う。)
4.ろ液をキャピラリーにとって、ペークロ用ろ紙に移す。
このとき、ドライヤーなどで乾かすのだが、電力などの関係で一斉にはできずに、困ることがある。
そこで、潰したアルミ缶ボトルに熱湯を入れたものを置き、その上でスポットをうつ。熱いので火傷に注意。
うったそばから乾いていく。
5.ゴム栓の切れ目にろ紙を挟み、展開液の入った試験管にセットする。
6.動かさないようにじっと待つ……。15分〜20分。
(私はこの間に、ペークロの原理を説明し、片づけを始めさせる。)
7.20分ほどしたら、ゴム栓をはずして、中のものを取り出す。
すぐに、展開液が進んだところ(溶媒前線)に鉛筆で線を引き、各スポットのまわりを印を付ける。
8.各スポットの中心までの距離を計り、溶媒前線の距離で割る(Rf値を求める)。
今回のデータ
距離(mm) | Rf値 | |
溶媒前線 | 70 | - |
黄色のスポット | 68 | 0.97 |
〃 | 62 | 0.89 |
〃 | 55 | 0.79 |
青緑のスポット | 30 | 0.43 |
緑のスポット | 21 | 0.30 |
Rf値(浜島書店 新詳生物図表より)
色素 | Rf値 |
β−カロテン(橙黄) | 0.9-1.0 |
ルティン(黄) | 0.7-0.8 |
ビオラキサンチン(黄) | 0.5-0.6 |
クロロフィルa(青緑) | 0.2 |
クロロフィルb(黄緑) | 0.1 |
う〜ん。Rf値はなかなか一致しません(; ;)。
9.その他の結果
(1)赤い葉の場合(今回は赤シソが手に入らなかったので、サザンカ(?)の若い葉を使いました)。
赤い色素は動かず、その他の光合成色素が同様に出てくる。
(2)水性ペン
展開液がトルエンの他に、水のものも用意しておき、水性ペンを展開させる。
(私は、これを光合成色素の分離の前に、練習用として生徒にやらせます。)